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產品型號：EN-130, 3 x 5 ug
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產品價格：
折 扣 率： 0
最后更新：2017-06-12
關 注 度：3521
生產企業：深圳市國泰宜豐科技有限公司
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產品詳細介紹修飾Lysine-C（賴氨酸肽鏈內切酶）測序級
來自于產酶溶桿菌的Lysine-C肽鏈內切酶是一種蘇氨酸蛋白酶，它高度特異性地裂解賴氨酸羧基端肽鍵。
Princeton Separations公司測序級肽鏈內切酶是高度純化的酶，通過化學修飾，降低了酶的自裂解，增加了酶的穩定性。由于在超的長消化期間酶持續保持活性，因此可以極好地控制蛋白裂解反應。
特性
來自于產酶溶桿菌的Lysine-C肽鏈內切酶是一種蘇氨酸蛋白酶，它高度特異性地裂解賴氨酸羧基端肽鍵。
化學修飾
使用Princeton Separations開發的一種方法將高純度酶制品進行化學修飾。這種修飾使酶呈現出自分解抗性和穩定的酶活性。該修飾酶在30°C反應緩沖液中孵育6小時，其仍能保持至少90%的酶活性，在同樣條件下孵育24小時，仍保持65%的活性 ,并仍保留對賴氨酸的特異性。
質量控制
我們公司對測序級Lysine-C肽鏈內切酶與測序應用相關的質量進行鑒定。兩種方法控制質量：一種是酰胺酶法；另一種是蛋白酶（消化）法，兩種方法都以酪蛋白為底物。以胰蛋白酶作為對照，同時消化酪蛋白，然后兩者進行比較，計算出Lysine-C肽鏈內切酶與胰蛋白酶活性等價的值。使用合成肽陣列檢測酶的特異性。
制備
每只小瓶裝有Lysine-C內切蛋白酶干粉5μg，用20μl去離子水或反緩沖液溶解，使蛋白酶濃度為0.25μg/μl
應用
將酶與蛋白以1：20或1：100比值（W/W）混合于標準的消化緩沖液如50mM 碳酸氫銨, pH 7.8 - 8.0。一般25-30°C，孵育1-10小時，在某些情況下可以延長到24小時。根據被蛋白的性質確定孵育時間。通過調整酶與樣品的比率可得到最佳孵育時間。需要指出的是Lysine-C的消化活性僅為胰蛋白酶的40%。
儲存
溶解的酶應冷凍儲存于-10 to - 20°C。
在變性中的穩定性
在蛋白難于溶解的情況下，則在消化之前將變性劑如尿素或鹽酸胍加入到蛋白混合液中。下表中所例舉的數據顯示變性劑對修飾 Lysine-C活性的影響。
變性劑 濃度 活性控制%
對照 — 100%
尿素 0.50M 100%
尿素 1.00M 100%
尿素 2.00M 100%
鹽酸胍 0.10M 100%
鹽酸胍 0.25M 80%
鹽酸胍 0.50M 30%
鹽酸胍 1.00M 10%
References
Jackson, R. L.., and Wolfe, R. S., J. Biological Chemistry 243, 879 (1968)
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產品目錄 產品說明
EN-130 Lysine-C 3 x 5 ug vials
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| 加入時間：2017-01-11
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